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        發(fā)布于 2024-08-13
        如何使用D-熒光素鉀鹽
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        熒光素鉀鹽使用說明:
        D-熒光素鉀鹽(K+)設(shè)計(jì)用于體外和體內(nèi)生物發(fā)光測(cè)定。D-熒光素鉀鹽一般為黃綠色,激發(fā)波長為494nm,發(fā)射波長為521nm。D-熒光素的質(zhì)量和純度對(duì)于獲得良好和可重復(fù)的結(jié)果至關(guān)重要。


        二、D-熒光素鉀鹽的使用方法:

        1. 溶液的制備
        D-熒光素鉀鹽的溶液可以用于染色、標(biāo)記、檢測(cè)等多種應(yīng)用。
        制備D-熒光素鉀鹽溶液的方法:
        a.首先稱取適量的D-熒光素鉀鹽,加入適量的去離子水中后進(jìn)行均勻攪拌;
        b.使用過濾膜將溶液過濾,除菌。
        c.將D-熒光素鉀鹽溶液調(diào)節(jié)至所需要的濃度。

        2. 染色實(shí)驗(yàn)過程
        D-熒光素鉀鹽可以用于細(xì)胞染色、組織染色等染色實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)方法如下:
        a.首先將細(xì)胞或組織樣本固定在載玻片上。
        b.然后加入適量的D-熒光素鉀鹽溶液,使試劑溶液可以覆蓋樣本。
        c.在黑暗條件下可以孵育一段時(shí)間,使D-熒光素鉀鹽充分滲透入細(xì)胞或組織中。
        d.使用PBS緩沖液洗滌樣本,去除多余的D-熒光素鉀鹽。
        e.在顯微鏡下觀察樣本,觀察樣品的熒光信號(hào)。

        3. 實(shí)驗(yàn)標(biāo)記
        D-熒光素鉀鹽也可以用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、核酸等生物分子。
        實(shí)驗(yàn)標(biāo)記方法:
        a.首先將蛋白質(zhì)或核酸與d-熒光素鉀鹽共同孵育。
        b.再用凝膠電泳等方法分離標(biāo)記后的生物分子。
        c.最后在熒光顯微鏡下觀察標(biāo)記后的生物分子即可。

        4. 檢測(cè)方法
        D-熒光素鉀鹽可用于檢測(cè)生物分子的存在和濃度。
        D-熒光素鉀鹽檢測(cè)方法:
        a.將d-熒光素鉀鹽與待檢測(cè)的生物分子進(jìn)行共同孵育。
        b.用凝膠電泳等方法分離孵育后的混合物。
        c.在熒光顯微鏡下觀察熒光信號(hào),即可判斷生物分子的存在和濃度。


        1.說明
        1.1.簡(jiǎn)介及特點(diǎn)
        D-熒光素,鉀鹽是一種合成螢火蟲熒光素。這種高純度、無內(nèi)毒素的產(chǎn)品
        非常適合體外和體內(nèi)生物發(fā)光測(cè)定。高質(zhì)量的基板消除了可能由于內(nèi)毒素的存在而干擾測(cè)定。中性條件下的正確包裝確保了產(chǎn)品的完整性和穩(wěn)定性。這種螢光素酶的水溶性基質(zhì)是現(xiàn)成的,易于使用。
        主要特點(diǎn)有:
        ?高純度>99.5%
        ?溶解性好,靈敏度高
        ?用于生物發(fā)光測(cè)定的可靠體內(nèi)報(bào)告基因
        ?不含內(nèi)毒素(非常適合體內(nèi)應(yīng)用)
        ?適用于體外實(shí)驗(yàn)
        ?易于使用
        ?在整個(gè)動(dòng)物體內(nèi)快速和更容易分布


        -熒光素,鉀鹽:
        ?化學(xué)名稱:4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸鉀鹽
        ?分子式:C11H7N2O3S2K
        ?分子量:318.42 g/mol
        ?CAS編號(hào):115144-35-9
        ?分子生物學(xué)等級(jí)和高級(jí)純度:99.7%純度。通過九個(gè)獨(dú)立標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證質(zhì)量包括HPLC和FTIR。


        1.2穩(wěn)定性和儲(chǔ)存
        ※ D-熒光素對(duì)光、氧氣和水分敏感,呈粉末狀和溶液狀。
        ※ 儲(chǔ)存(粉末)收到并長期使用后,將粉末儲(chǔ)存在密閉的干燥容器,-20°C。D-熒光素在-20℃下至少穩(wěn)定一年干燥和中性氣體條件。
        ※ 如果裝有D-熒光素粉末的瓶子必須反復(fù)打開和關(guān)閉,建議用惰性物質(zhì)填充小瓶氣體(氬氣或氮?dú)猓?/span>
        ※ 儲(chǔ)存(溶液)D-熒光素儲(chǔ)備溶液可以在水中或D-PBS中制備,然后在-20°C下冷凍或優(yōu)選在-80°C下。D-熒光素溶液的穩(wěn)定性是相當(dāng)有爭(zhēng)議的
        ※ 解決方案:盡管存在以上問題,冷凍的D-熒光素溶液(-80°C)仍然適合使用,D-熒光素是在低pH(<6.5)和高pH(>7.5)下相當(dāng)不穩(wěn)定。為了避免重復(fù)的冷凍和解凍循環(huán),我們建議用小管等分D-Luciferin溶液,并將其儲(chǔ)存在-80°C下。


        2.應(yīng)用
        ※ 活細(xì)胞、組織和動(dòng)物模型中的生物發(fā)光測(cè)定
        ※ 螢光素酶報(bào)告基因測(cè)定
        ※ 全動(dòng)物成像(體內(nèi)和體外基因測(cè)定)
        ※ 熒光素酶基因實(shí)驗(yàn)
        ※ ATP測(cè)定(螢光素酶催化ATP轉(zhuǎn)化為AMP)和免疫測(cè)定
        ※ 焦磷酸測(cè)序
        ※用于序列基因分析實(shí)驗(yàn)

        作者:未知 來源:未知
        2024-08-21
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