生物樣品前處理方法詳解
生物樣品前處理是生物實驗和分析過程中的一個重要步驟，涉及到從生物體或者環(huán)境中提取、純化、濃集目標(biāo)分析物，以便于后續(xù)分析檢測。其難點在于如何高效、準確地從復(fù)雜的樣品基質(zhì)中提取和純化低濃度目標(biāo)分析物，同時保持方法穩(wěn)定性和重復(fù)性。
樣品采集
全血
包括液體成分的血漿和分散懸浮于其中的血細胞。
全血不易保存，且血細胞中含有很多干擾物質(zhì)，僅用于血漿藥物濃度太低或血漿藥物濃度波動較大、難以控制的藥物分析。
血漿
將采集血液置含有抗凝劑的試管中，3000-4000r/min離心，取上清液即為血漿。
一般血漿中藥物濃度高于血清，經(jīng)采血后可立刻離心分離，低溫保存；但血漿中蛋白含量較多，在SPE過程可能產(chǎn)生堵塞，其中抗凝物質(zhì)可能干擾化合物檢測。
血清
采血后不加任何抗凝劑，于室溫下靜置15-30min，待其自然凝結(jié)后離心，取上清液即為血清。
血清較血漿相比少了大部分纖維蛋白，顏色較血漿更淺，干擾物質(zhì)更少。
抗凝劑
| 品名 | CAS |
| 乙二胺四乙酸二鉀鹽二水化合物Ethylenediaminetetraacetic acid dipotassium salt dihydrate | 25102-12-9 |
| 乙二胺四乙酸三鉀二水合物Ethylenediaminetetraacetic acid tripotassium salt dihydrate | 65501-24-8 |
| 肝素鈉Heparin sodium salt | 9045-22-1 |
| 肝素鋰Heparin lithium salt | 9045-22-1 |
| 氟化鈣Calcium fluoride | 7789-75-5 |
| 草酸鉀一水合物Potassium oxalate monohydrate | 6487-48-5 |
| 檸檬酸三鈉鹽二水合物Sodium citrate tribasic dihydrate | 6132-04-3 |
樣品存儲
采樣后如需短期保存可4°C冷藏，長期保存則可-20°C冷凍，但需要避免反復(fù)凍融。
可根據(jù)樣品性質(zhì)加入酶抑制劑、抗氧化劑等。
