高效液相色譜法測定甲硝唑含量

       甲硝唑是一種常用的抗生素，用于治療由厭氧菌引起的感染。高效液相色譜法（HPLC）是一種用于分離和分析極性和非極性化合物的色譜技術，具有快速、靈敏、準確的特點。內標法是一種常用的定量分析方法，通過在樣品中加入內標物質，根據內標物與待測物質的峰面積比計算待測物質的含量。

實驗試劑

  實驗步驟

1、色譜條件的選擇

????1)波長的選擇：選擇甲硝唑的最大吸收波長作為測定波長。

????2)流動相的選擇：使用甲醇-草酸水溶液（0.002mol?L?1）作為流動相。

2、內標物溶液的配制

????準確稱取土霉素，制成100mg?L?1的內標物溶液。

3、對照品溶液的制備

????準確稱取甲硝唑，制成100mg?L?1的對照溶液。

4、樣品溶液的制備

????取甲硝唑片研細，準確稱取適量，制成供試品溶液。

5、甲硝唑和土霉素純物質保留時間測定

????記錄內標物和對照品的保留時間。

6、校正因子的測定

????混合內標物和對照品溶液，計算相對校正因子。

7、樣品的測定

????混合樣品溶液和內標物溶液，進樣分析。

實驗小貼士:

用內標法進行定量分析時，內標物的選擇應符合什么要求？

????內標物的選擇應符合以下要求：與樣品中的待測物質在色譜條件下的分離度良好；與待測物質在化學性質上相似；不與待測物質發生反應；內標物在樣品中的添加量與待測物質的量比適當。