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發布于 2023-08-31
如何配制LB培養基
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  LB培養基,是微生物學實驗中最常用的培養基,用于培養細菌等細菌,其分為液相LB培養基,瓊脂制成的固態LB培養基。加入抗生素的LB培養基可用于篩選以抗生素為主機的克隆。


       一般LB培養基的名稱被廣泛稱之為Luria-Bertani 培養基,根據該培養基的發明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的解釋,這個名字來源于英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯。


LB培養基的主要成分:

序列成分用量
1胰蛋白胨(tryptone)10g
2酵母提取物(yeast extract)5g
3氯化鈉(NaCl)10g
4瓊脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(900-1000)15-20g
5瓊脂粉 灰分ash ≤1.5%,Low gel strength(1200-1400)


      備注:加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調pH至7.2,121℃滅菌30min


LB培養基的配制方法:


  (1)稱量:分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。
  (2)溶化:加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。
  (3)調節pH:用1mol/L NaOH溶液調pH至7.2。
  (4)定容:將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。
  (5)加瓊脂:加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。
  (6)分裝、加塞、包扎。
  (7)高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌約20min。

作者:未知 來源:未知
ELISA實驗
2023-09-08
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