“四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)”
即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法。MTT是一種噻唑鹽,化學(xué)名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液為黃橙色。小鼠脾細(xì)胞受到ConA作用后發(fā)生增殖活化,其胞內(nèi)線粒體琥珀酸脫氫酶活性相應(yīng)升高,MTT作為其底物參與反應(yīng),形成藍(lán)色的甲臜(Formazan)顆粒沉積于細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞周圍,經(jīng)鹽酸—異丙醇溶解后為藍(lán)色溶液,可用酶標(biāo)測定儀測定細(xì)胞培養(yǎng)物的OD值,測定波長570nm。根據(jù)OD值的大小計(jì)算反應(yīng)體系中細(xì)胞增殖程度。
目前MTT法常用于以下幾個方面的研究:
1、檢測細(xì)胞活性:常作為細(xì)胞毒性試驗(yàn)的一種方法。
2、體外藥物敏感實(shí)驗(yàn):該方法簡便、經(jīng)濟(jì)、快速,重復(fù)性好,所需的細(xì)胞數(shù)較少,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。
3、一些細(xì)胞因子活性的研究。