一、液相色譜柱的清洗簡介：迄今為止，反相色譜法是高效液相色譜法中使用最廣泛的技術，主要是因為它適用于分析大多數非極性物質以及許多可電離和離子化的化合物，使用反相方法時，必須考慮可能的基質相互作用，當色譜柱被污染時，其色譜行為將與未污染的色譜柱略有不同，污染的色譜柱會產生反壓問題。
必須清潔并重建被污染的反相色譜柱，以恢復原始操作條件，通常，樣本中包含分析師不感興趣的內容，鹽，脂質，含脂質的物質，腐殖酸，疏水性蛋白質和其他生物物質是一些在使用過程中可能與HPLC色譜柱相互作用的物質，這些物質的保留值小于或等于分析人員的目標。

二、液相色譜柱的清洗所需材料及試劑：

甲醇、氯乙烷、四氫呋喃

三、液相色譜柱的清洗步驟

再生受污染的HPLC色譜柱的關鍵是了解污染物的性質并找到合適的溶劑進行去除。如果在重復進樣過程中由于強保留物質的積累引起污染，則使用簡單的步驟去除這些污染物通常可以恢復其色譜行為。有時，在多次操作后，會用90％到100％的溶劑B（雙溶劑反相系統中的較強溶劑）沖洗色譜柱，以沖洗20體積以除去污染物。
例如，塔中剩余的脂質可與非水溶劑（如甲醇，氯乙烷和四氫呋喃）一起使用。

四、液相色譜柱的清洗注意事項：

如果使用緩沖液系統，請勿直接切換到強溶劑，突然切換到高濃度有機溶劑可能會使HPLC流動系統中的緩沖液沉淀，這可能引起更大的問題，例如柱頭堵塞，管道堵塞和泵堵塞，泄漏，活塞損壞或噴射閥軸故障，應首先使用無緩沖流動相（即，將緩沖液更改為水），沖洗5至10體積后，更換強溶劑。