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        發(fā)布于 2023-09-29
        液相色譜柱的清洗
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        一、液相色譜柱的清洗簡(jiǎn)介:迄今為止,反相色譜法是高效液相色譜法中使用最廣泛的技術(shù),主要是因?yàn)樗m用于分析大多數(shù)非極性物質(zhì)以及許多可電離和離子化的化合物,使用反相方法時(shí),必須考慮可能的基質(zhì)相互作用,當(dāng)色譜柱被污染時(shí),其色譜行為將與未污染的色譜柱略有不同,污染的色譜柱會(huì)產(chǎn)生反壓?jiǎn)栴}。
        必須清潔并重建被污染的反相色譜柱,以恢復(fù)原始操作條件,通常,樣本中包含分析師不感興趣的內(nèi)容,鹽,脂質(zhì),含脂質(zhì)的物質(zhì),腐殖酸,疏水性蛋白質(zhì)和其他生物物質(zhì)是一些在使用過(guò)程中可能與HPLC色譜柱相互作用的物質(zhì),這些物質(zhì)的保留值小于或等于分析人員的目標(biāo)。


        二、液相色譜柱的清洗所需材料及試劑:

        甲醇、氯乙烷、四氫呋喃


        三、液相色譜柱的清洗步驟

        再生受污染的HPLC色譜柱的關(guān)鍵是了解污染物的性質(zhì)并找到合適的溶劑進(jìn)行去除。如果在重復(fù)進(jìn)樣過(guò)程中由于強(qiáng)保留物質(zhì)的積累引起污染,則使用簡(jiǎn)單的步驟去除這些污染物通常可以恢復(fù)其色譜行為。有時(shí),在多次操作后,會(huì)用90%到100%的溶劑B(雙溶劑反相系統(tǒng)中的較強(qiáng)溶劑)沖洗色譜柱,以沖洗20體積以除去污染物。
        例如,塔中剩余的脂質(zhì)可與非水溶劑(如甲醇,氯乙烷和四氫呋喃)一起使用。


        四、液相色譜柱的清洗注意事項(xiàng):

        如果使用緩沖液系統(tǒng),請(qǐng)勿直接切換到強(qiáng)溶劑,突然切換到高濃度有機(jī)溶劑可能會(huì)使HPLC流動(dòng)系統(tǒng)中的緩沖液沉淀,這可能引起更大的問(wèn)題,例如柱頭堵塞,管道堵塞和泵堵塞,泄漏,活塞損壞或噴射閥軸故障,應(yīng)首先使用無(wú)緩沖流動(dòng)相(即,將緩沖液更改為水),沖洗5至10體積后,更換強(qiáng)溶劑。

        作者:未知 來(lái)源:未知
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