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發布于 2022-09-08
蛋白酶K產品性質與注意事項
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產品描述:
Proteinase K(蛋白酶K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對分子量約為29.3 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實驗,而變性劑如SDS(1%)可提高其活性,常用工作濃度為50-100 μg/mL,根據所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。
 
產品性質:
1)本品來源于基因重組酵母菌株;
2)純度(Native PAGE電泳檢測):≥95%;
3)比活性值(Specific activity):≥30 U/mg蛋白;
4)不含RNase和DNase;
5)在尿素和SDS中活性穩定存在;
6)在較廣的pH范圍內(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳pH范圍為pH 7.5 - 9.0;
7)反應條件:反應緩沖液中37℃ - 70℃溫育1 h。推薦反應溫度選擇70℃;
8)活力單位定義:在37℃,pH 7.5的條件下,每分鐘釋放1 μM酪氨酸所需要的Proteinase K量定義為1個活性單位;
9)失活方法:反應體系中加入PMSF或DFP抑制劑即可失活,65℃溫育10-15 min可部分失活。
 
運輸和保存方法:
冰袋運輸。4℃干燥保存,有效期3年。更長期保存,可置于-20℃冷凍保存。
使用方法
1. 20-40 mg/mL Proteinase K儲存液的配制
1)將干粉溶解于稀釋緩沖液中,配制成40-80 mg/mL原液;
【注】:稀釋緩沖液配方:20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。
2)使用低蛋白吸附的0.22 μm濾器過濾除菌;
3)加入等體積無菌甘油,配制成含50%甘油的Proteinase K儲存液。
【注】:Proteinase K儲存液4℃保存1年。若需反復使用,需分裝保存。

按照核酸提取說明書添加指定量Proteinase K儲存液即可。

 
注意事項:
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)啟用后如需反復使用,需置于-20℃~-80℃冰箱冷凍或者配制成溶液后過濾除菌分裝保存。
3)本產品僅作科研用途!


作者:未知 來源:網絡轉載
2022-08-23
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